|
|
|
|
Эффекторные Т-лимфоциты памяти, раннее метастазирование и выживаемость при колоректальном раке. |
|
|
25.01.06
|
Начало метастазирования рака проявляется в сосудистых эмболах, в прорастании в лимфатические пути и в прорастании вдоль нервов (в англоязычной литературе эти три процесса обозначаются с помощью аббревиатуры «VELIPI» - Vascular Emboli, Lymphatic Invasion, Perineural Invasion). Пока неясно, какую роль в этих процессах играет иммунная система организма. Авторы настоящего исследования решили выяснить, имеется ли связь VELIPI при колоректальном раке с медиаторами воспаления или с медиаторами, подавляющими иммунный ответ, а также, связано ли отсутствие VELIPI с адаптивным иммунным ответом.
Методы и ход исследования.
Изучены истории болезни и морфология опухолей у 959 больных колоректальным раком, которые проходили лечение в Европейской больнице Лаэннека−Жоржа Помпиду (Laёnnec−Georges Pompidou, Париж) в период между 1986 и 2004 гг. За срок наблюдения принимали период между постановкой диагноза и последним обследованием, либо смертью. В среднем этот срок составил 44,5 мес. Опухоль считалась VELIPI-положительной, если обнаруживался хотя бы 1 из 3 перечисленных выше признаков. Все препараты опухолей после окраски гематоксилином и эозином изучались на присутствие лимфоидных инфильтратов и лимфоидной реакции по краю опухоли. Плотность этих инфильтратов оценивали с помощью особой шкалы: 1 балл – слабо выраженный инфильтрат, 2 балла – умеренно выраженный, 3 балла – сильно выраженный.
Для оценки местного иммунного ответа применяли следующие методики:
1. Проточная флюорометрия применена в дисперсиях из 39 только что удаленных опухолей. Эти дисперсии инкубировали вместе с антителами против маркеров иммунных клеток. Анализ проводился с помощью четырехцветного устройства по сортировке клеток, активированного флюоресценцией (four-color fluorescence-activated cell sorter). Подсчитывали в процентах долю иммунных клеток (всей их популяции и CD3+ клеток).
2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном масштабе времени (у 75 опухолей). Эти опухоли были выбраны наугад из 959 колоректальных раков. С помощью ПЦР оценивали экспрессию определенных генов: генов воспаления, генов, отвечающих за подавление иммунного ответа, а также генов адаптивного иммунного ответа.
3. Микростолбцы ткани (tissue microarrays), получаемые из двух репрезентативных участков парафиновых блоков 415 опухолей (центр опухоли и ее край, вдоль которого происходила инвазия). Эти микростолбцы затем нарезали на срезы толщиной 5 μм и окрашивали (окраска гематоксилином Харриса [Harris], иммуногистохимическая окраска с применением антител против CD45RO и CD3). Оценивали плотность CD45RO+ клеток (их число на 1 мм2).
Сопоставляли данные патоморфологических исследований с общей и свободной от заболевания выживаемостью.
Результаты.
5-летняя выживаемость, свободная от заболевания, была достоверно выше у больных без признаков VELIPI по сравнению с пациентами, у которых отмечались эти признаки (соответственно, 32,4% и 12,1%). Общая 5-летняя выживаемость составила 35,5% и 13,2% соответственно. Аналогичное различие наблюдалось и по медиане срока выживаемости, свободной от заболевания: соответственно, 26,9 месяцев и 3,3 месяца.
После поправки на стадию по системе TNM многофакторный анализ подтвердил, что отсутствие VELIPI является достоверным независимым фактором более благоприятного прогноза.
Наличие сильно выраженного иммунного инфильтрата (3 балла) оказалось связанным с VELIPI-отрицательными опухолями.
Защитные иммунные реакции осуществляются при содействии эффекторных Т-лимфоцитов памяти с фенотипом CD8+, CD45RO+, CCR7−, CD62L−, перфорин+, гранулизин+, гранзим+. Стимуляция этих клеток антигеном индуцирует немедленное выделение ими цитотоксических медиаторов. В настоящей работе с помощью ПЦР показано, что у VELIPI-отрицательных опухолей по сравнению с VELIPI-положительными опухолями достоверно повышены уровни CD8a, гранзима В и гранулизина. В большей степени это различие выражено при отдельном сравнении с VELIPI-положительными опухолями VELIPI-отрицательных опухолей, которые не рецидивировали. CD8a, гранзим В и гранулизин относятся к медиаторам адаптивного иммунного ответа. Аналогичная закономерность выявлена и для ряда других медиаторов этой группы: T-BET, регуляторного фактора интерферона 1, интерферона g: они были достоверно выше у нерецидивировавших VELIPI-положительных раков по сравнению с рецидивировавшими VELIPI-отрицательными.
Уровни же генов, кодирующих медиаторы воспаления, и генов, отвечающих за медиаторы подавление иммунного ответа, существенно не различались между VELIPI-положительными и VELIPI-отрицательными опухолями.
С помощью проточной флюорометрии показано, что в VELIPI-отрицательных опухолях была существенно более выражена инфильтрация Т-лимфоцитами трех типов: CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+.
Иммунногистохимическое исследование выявило существенно большее содержание CD45RO+ клеток в VELIPI-отрицательных опухолях по сравнению с VELIPI-положительными. Наличие этих клеток оказалось независимым положительным прогностическим фактором в отношении 5-летней общей выживаемости и 5-летней выживаемости, свободной от колоректального рака. Так, при высокой плотности CD45RO+ клеток в опухолях эти показатели составили, соответственно, 46,3% и 43,1%, в опухолях же с низким содержанием этих клеток ¬– лишь 23,7% и 21,5%.
Выводы.
При наличии более активного иммунного ответа в ткани колоректальных раков реже наблюдаются ранние признаки метастазирования (VELIPI). Соответственно у таких больных выше общая и свободная от заболевания выживаемость.
Источник.
Pagés F. et al. Effector memory T cells, early metastasis and survival in colorectal cancer. N Engl J Med. Dec. 24, 2005; 353: 2654-66 |
|
Главная страница
|
|
|
|
|
